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PAC Dermatologia-1 Libro 2

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

EXÁMEN DIRECTO

Es el método más sencillo para saber que un hongo es el causante de la infección a estudiar. Este se realiza colocando el material, como escamas, uñas y pelos en un portaobjetos al cual se agrega una gota de KOH (hidróxido de potasio) al 10 ó 20%; esta sustancia sirve para disolver el material de fondo y así poder observar mejor los elementos fúngicos, en algunos laboratorios se añade DMSO (dimetilsulfóxido) en una proporción de 60/4 lo cual facilita la absorción del KOH. Sobre la muestra se coloca un cubreobjetos y se observa con el microscopio de luz a un aumento de 10x ó 20x para localizar las estructuras del hongo y luego estudiamos el campo sospechoso a un aumento de 40x. La luz se debe disminuir y el condensador se pone en una posición baja para poder apreciar mejor los elementos fúngicos los cuales no tienen color; utilizando el negro de clorazol podemos evitar este problema ya que nos da mejor contraste. Otro material que puede utilizarse es el calcofluor que se agrega al KOH, esta sustancia tiñe las paredes de celulosa presentes en el hongo y la muestra se observa con microscopio de flourescencia. La lectura del examen directo requiere paciencia y tiempo, muchos artefactos pueden dar imágenes parecidas a los elementos del hongo, ejemplo de ellos son las mismas estructuras lipídicas entre las células epidérmicas, la precipitación de KOH que nos da el mosaico fúngico; también el polvo, los hilos, pueden causar confusión, lo que vamos a observar en presencia de dermatofitos son filamentos tabicados o fragmentados en artroconidios rectangulares o redondeados escasos o abundantes y los filamentos pueden tener ramificaciones cortas o largas.^9,10,11

LUZ DE WOOD

Inventada en 1903 por Robert W. Wood, un físico de Baltimore, es un elemento valioso en la práctica médica; su uso en dermatología se inicio desde 1925 para la detección de infección por hongos en el pelo. Actualmente es utilizada también para la detección de enfermedades con alteración de la pigmentación. La lámpara emite una fluorescencia entre los 320 y 400 nm y se utiliza en cuarto obscuro. En las tiñas de la cabeza producidas por M. canis y M. audouinii se observa una fluorescencia verde brillante, el T.schoenleinii produce una fluorescencia azul clara mientras que en las tiñas por T.tonsurans es negativa. Es importante saber que la presencia de escamas, ungüentos y otras sustancias colocadas por el paciente pueden producir falsos positivos.¹²

CULTIVO

El medio de Sabouraud es el medio de rutina en cualquier laboratorio de micología. Para el estudio de dermatofitos es necesario agregar cloranfenicol y cicloheximida (Mycosel) lo cual inhibe el crecimiento de bacterias y otros hongos saprofitos; las siembras pueden hacerse en cajas de Petri o en tubos. Los cultivos deben incubarse por 14 días a temperaturas entre 25 y 30º C.
La identificación del dermatofito causante de la infección requiere de una revisión consistente y organizada de su morfología in vitro. Los elementos más importantes a considerar son: textura, topografía y pigmentación. La textura puede ser lanuginosa, algodonosa, pulverulenta, (de granos finos o arenosos), filamentosa o lisa. La topografía puede ser plana, levantada, en pliegues, cerebriforme y crateriforme.

El examen directo es el método más sencillo para saber que un hongo es el causante del problema en estudio.

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